英语孙老师
作者：梅奥医学翻译 | 关注：2023-05-12 14:40:53 | 关注：
公司： 北京华尔盾生物技术有限公司
行业： 制药/生物工程
职位： 细胞培养员
最高学历
学历： 硕士
专业： 生物科学，技术
学校： 中国人民解放军 军事医学科学院
自我评价
熟练掌握生物技术上游、中游实验技术，如：基因克隆、载体构建、基因异源表达（大肠杆菌系统、酵母系统）、基本发酵技术、产物纯化及检测(SDS-PAGE、Native-PAGE、Western blot、HPLC)；对上游、下游及后续实验有整体了解，能独立操作分子克隆实验、蛋白表达及纯化和鉴定；学习能力强，关注国内外生物医药领域研究动向。 熟练查阅专业文献，并正确理解。能独立设计实验方案并进行统计分析；有一定的分析问题和解决问题的能力。
外语：能熟练阅读、翻译和理解英文专业文献；通过北京市硕士研究生学位统考(GET)，及CET-4。
计算机：熟练应用MS OFFICE软件及常用生物学软件。
工作经验
2006 /6--2007 /10：北京华尔盾生物技术有限公司（50-150人） [ 1年4个月]
所属行业： 制药/生物工程
生产部 细胞培养员
CHO细胞的传代、培养，细胞培养上清的收集。
项目经验
2009 /4--2011 /4：国家自然科学基金 (No.30870050)项目：大肠杆菌对胸腺素α原N末端乙酰化修饰的机理研究
项目描述： 一般认为原核生物（如大肠杆菌）缺乏蛋白质翻译后修饰现象，如糖基化、乙酰化。但本实验室前期研究发现用大肠杆菌表达的胸腺素α原有部分乙酰化修饰。现已确知大肠杆菌的N-末端乙酰基转移酶有RimI、RimJ和RimL，它们分别负责大肠杆菌核糖体蛋白S18 、S5和L12的N-末端乙酰化修饰。本研究通过Red重组技术将大肠杆菌的三个Nα-乙酰基转移酶基因rimI、rimJ和rimL分别敲除及组合敲除，构建了一系列的基因缺陷株，在这些缺陷株中表达ProTα，研究RimI、RimJ和RimL对ProTα乙酰化修饰的影响。具文献报道，蛋白质的N-末端氨基酸序列影响其N-末端乙酰化，本研究构建一系列ProTα N-末端氨基酸序列突变株，通过MALDI-TOF MS检测突变株的分子量，并推断ProTα突变株的乙酰化情况。本研究发现，大肠杆菌的RimJ蛋白是ProTα的主要修饰酶，只要敲除rimJ基因，ProTα就不能乙酰化，而在大肠杆菌野生菌及rims全敲除的三缺陷菌中过表达rimJ或rimL，均能使ProTα几乎完全乙酰化，其中过表达rimL的研究结果与文献报道的体外实验结果不同。另外，过表达rimI抑制ProTα的乙酰化水平，并具有统计学意义；本研究发现，蛋白质的N-末端氨基酸序列影响其乙酰化修饰水平，但具体机理还不清楚。我们的课题为大肠杆菌N-末端乙酰化修饰研究提供了一个新的模型和思路，为以后的研究奠定基础，也为用基因工程法制备N-末端乙酰化的Tα1提供思路。
责任描述： 项目主要执行人，负责文献调研、课题设计、基因敲除、蛋白突变体构建、蛋白表达纯化、RP-HPLC分析、数据整理分析。
2009 /3--2011 /4：原核生物糖基工程
项目描述： 随着DNA测序技术、生物信息学及分析方法的发展，越来越多的病原菌基因组测序工作及基因注释已完成。最近，在细菌中发现了蛋白质的糖基化修饰系统，最具代表性的是空肠弯曲弧菌的N-糖基化修饰系统、脑膜炎奈瑟球菌和绿脓杆菌的O-糖基化修饰系统。这些糖基化修饰系统能成功的转移到大肠杆菌中并且仍然独立发挥其糖基化修饰作用。另外，寡糖转移酶对糖底物特异性要求非常低，这使按照我们的需求来“定制糖蛋白”成为可能，即，我们可以利用符合自己需求的多糖来修饰目的蛋白，这标志着“原核生物糖基工程”的到来，并将为利用细菌生产糖结合疫苗和小分子糖蛋白药物的发展提供良好的契机。课题的研究目的就是要在大肠杆菌中建立一套糖基化修饰系统，本研究拟在大肠杆菌内重建脑膜炎奈瑟球菌O-糖基化修饰系统，利用寡糖转移酶对糖底物的低特异性，用多种多糖分别修饰目的蛋白。目前以宋内氏志贺菌的O-antigen及肺炎链球菌的CPS作为多糖的研究模型，来修饰脑膜炎奈瑟球菌的菌毛蛋白，并得出相关结论。同时，我对原核生物糖基化研究作了较为详细的文献综述《原核生物糖基化修饰系统及其应用前景》（已接受）。
责任描述： 项目主要执行人，负责文献调研、课题设计、基因敲除、大片段基因克隆，表达载体构建，产物检测。